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介紹大鼠心肌原代細胞的處理方法

  • 發布日期:2021-12-24      瀏覽次數:89
    •   原代心肌細胞培養是體外研究心血管疾病相關機制的主要手段和基本技術?;A實驗中,與細胞系相比,原代心肌細胞的形態及電生理方面更接近在體細胞,因此,培養原代心肌細胞的質量直接關系實驗的進程及結果。
        心肌細胞培養作為一種體外研究模型,可以更便捷的從細胞和分子水平對其生長、發育、生理、代謝、病理等進行研究。在許多研究領域原代培養心肌細胞作為一種主要的研究模型,被廣泛應用于心血管研究之中。
        介紹大鼠心肌細胞的處理方法:
        1、大鼠的選擇
        新生大鼠鼠齡的選擇新生大鼠心肌細胞在出生后3d內具有部分的增殖能力,成年大鼠心肌細胞則為終末分化細胞,不再具有分裂增殖能力。因此,大鼠出生時間越短,其心肌細胞分離后成活率越高,越容易貼壁生長。大量觀測表明,選擇1~3d齡大鼠分離其心肌細胞進行原代培養較為理想.其中尤以半日齡大鼠心肌細胞培養效果較佳。
        2、最常見的酶消化法
        0.1%的胰蛋白酶重復消化乳鼠心肌組織多次,收集的細胞用含15%胎牛血清的MEM培養基混懸后過濾,純化心肌細胞后置CO2培養箱孵育。結果培養的心肌細胞4~6h后開始貼壁生長,12~24h明顯增殖,3~4d后細胞匯合成片。在倒置顯微鏡下心肌細胞呈圓形,梭形,多角形,伸出偽足,出現自發性節律性搏動。結論應用酶消化法可簡便,快速地獲得大量活力高的心肌細胞。
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