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小鼠胚胎成纖維細胞MEF

小鼠胚胎成纖維細胞MEF

簡要描述:
小鼠胚胎成纖維細胞MEF
取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養建立。該細胞可用作飼養層細胞,支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態。當作為飼養層細胞時,MEF需經絲裂mei素C處理停止生長。建議作為ES細胞的飼養層時,MEF不要超過6代。

更新時間:2021-11-29

訪問量:136

產品型號:AW-mic-048

廠商性質:生產廠家

品牌其他品牌應用領域醫療衛生,生物產業

小鼠胚胎成纖維細胞MEF 種屬鑒定 安為生物

小鼠胚胎成纖維細胞MEF

MEF【MEF】

l 細胞鑒定

種屬鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞背景

取孕9天的615小鼠胚胎,去除腦、心臟等培養建立。該細胞可用作飼養層細胞,支持胚胎干細胞ES的生長并維持ES未分化的狀態。當作為飼養層細胞時,MEF需經絲裂mei素C處理停止生長。建議作為ES細胞的飼養層時,MEF不要超過6代。

l 細胞特性

 

1) 來源:小鼠胚胎

2) 形態:成纖維細胞樣,貼壁生長

3) 含量:>1x106  細胞數

4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用

l 培養條件

1) 準備D/F12(推薦awcell-0005)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

l 注意事項

 

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10?S的培養基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

l 運輸形式

低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

常溫: (2) T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。

 

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