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人胚腎細胞293T

人胚腎細胞293T

簡要描述:
人胚腎細胞293T/HEK-293T細胞是293T(293tsA1609neo)細胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。細胞持續表達SV40抗原,該細胞常用于轉染實驗,轉染效率較高。

更新時間:2021-11-30

訪問量:196

產品型號:hek-293T

廠商性質:生產廠家

品牌其他品牌應用領域醫療衛生,生物產業

                 HEK-293T 人胚腎細胞    

HEK-293T293T

l 細胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞背景

HEK-293T細胞是293T293tsA1609neo)細胞系(ATCC CRL-11268)的衍生物。細胞持續表達SV40抗原,該細胞常用于轉染實驗,轉染效率較高。(轉染一般以50%密度鋪板,待細胞剛剛貼到皿壁上后(一般8-10小時),即可進行轉染操作)

l 細胞特性

1 來源:人胚胎腎臟

2 形態:上皮細胞樣,貼壁生長,貼壁能力較弱

3 含量:>1x106  細胞數

4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5 用途:僅供科研使用

l 培養條件

1) 準備DMEM(推薦awcell-0001)培養基;優質胎牛血清,10%;L-谷氨酰胺(2mM)1%;NEAA  1% ; 雙抗 1%

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

l 注意事項:

人胚腎細胞293T該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞,傳代可以參考以下方法:

1. 收集:將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mL,T752-3mL)置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10?S的培養基來終止消化。

3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

人胚腎細胞293T細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

l 運輸形式

低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

常溫(2) T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全:

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。

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